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镁离子在PCR中的作用是与dNTP、核酸骨架相互作用,影响Polymerase的活性。
镁离子浓度对PCR扩增效率影响很大,浓度过高可降低PCR扩增的特异性,浓度过低则影响PCR扩增产量,甚至使PCR扩增失败而不出扩增条带;
一般镁离子的浓度在0.5毫摩尔每升到5毫摩尔每升之间,调整dNTP的浓度后要相应的调整镁离子的浓度。