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1、包被的浓度:高浓度或低浓度会产生不一样的结果;
2、封闭:封闭的好与不好决定显色后底色会不会有,或者有多少;
3、孵育时间和温度:不同的孵育时间和温度出现的结果也会不同;
4、显色时间和温度:不同的显色时间和温度会造成不一样的结果;
5、整个缓冲液体系的配方:有的缓冲液能起到减少底色的作用。